流式細胞儀是對細胞進行自動分析和分選的裝置。它可以快速測量、存貯、顯示懸浮在液體中的分散細胞的一系列重要的生物物理、生物化學(xué)方面的特征參量，并可以根據(jù)預(yù)選的參量范圍把規(guī)定的細胞亞群從中分選出來。下面說說儀器的調(diào)試和校準：
 

　　流式細胞儀在使用前，甚至在使用過程中都要精心進行調(diào)試，以保證工作的可靠性和最佳性。調(diào)試的項目主要是激光強度、液流速度和測量區(qū)的光路等。
 

　　激光強度：除調(diào)整反射鏡的角度以調(diào)整到所需波長的激光出光外，還要結(jié)合顯示屏上的光譜曲線使激光的強度輸出為最大。
 

　　液流速度：可通過操作臺數(shù)字顯示監(jiān)督，調(diào)節(jié)氣體壓力大小以獲得穩(wěn)定的液流速度。
 

　　測量區(qū)光路調(diào)節(jié)：這是調(diào)試工作的關(guān)鍵。需要保證在測量區(qū)的液流、激光束、90散射測量光電系統(tǒng)垂直正交，而且交點較小。一般可在用標準熒光微球等校準中完成。
 

　　流式細胞術(shù)中所測得的量是相對值，因此需要在使用前或使用中對系統(tǒng)進行校準或標定，這樣才能通過相對測量獲得絕對的意義。
 

　　因而FCM中的校準具有雙重功能：儀器的準直調(diào)整和定量標度。標準樣品應(yīng)該穩(wěn)定，有形成份形狀應(yīng)是大小比較一致球形，樣品分散性能良好，且經(jīng)濟、容易獲得。常用標準熒光微球作為非生物學(xué)標準樣品，雞血紅細胞做為生物學(xué)標準樣品。微球用樹脂材料制作，或標有熒光素，或不標記熒光素。所用的雞血紅細胞標準樣品制作過程昭下：取3.8%枸櫞酸或肝素抗凝的雞血(抗凝劑：雞血=1：4)，經(jīng)PBS清洗3次，再用5～10ml的1.0%戊二醛與清洗后的雞紅細胞混合，室溫下振蕩醛化24h，最后經(jīng)PBS再清洗，貯4℃冰箱中備用。需要指出的是因為未經(jīng)熒光染色，所測光信號為雞血紅蛋白的自發(fā)熒光。
 

　　美國BD公司的influx是可同時配置7根激光，檢測多達24色的流式細胞儀，儀器激發(fā)光路系統(tǒng)：不同波長的激光光路獨立，對樣品進行空間立體激發(fā)。開放式的激光平臺，可同時安裝1到7個激光器，并都可以同時開啟使用。多24熒光通道、26參數(shù)檢測。